抗精子抗体怎么检查啊

抗精子抗体相关介绍及检查方法

抗精子抗体是一种复杂的病理产物，男性和女性都可能罹患。它会对男性精液产生抵抗作用，阻碍精子与卵子正常结合，进而导致不孕不育。不过，其确切致病原因目前尚未完全明确。以下为您介绍抗精子抗体的检查方法：

酶联免疫吸附试验

1. 精子抗原制备：筛选收集精液常规检查正常的精液，用生理盐水反复离心洗涤，尽可能除去精浆。经超声波超声粉碎10 - 15min后高速离心，吸取上清液，测定其蛋白浓度，并将蛋白浓度稀释为3.5 - 5.0μg/mL，制成精子抗原溶液。
2. 反应板包被抗原：将人精子抗原稀释成3.5 - 5μg/mL，把包被液加到聚氯乙烯微量测定板内，每孔100μL，放置于4℃冰箱过夜。
3. 封闭处理：次日早晨，倾去抗原溶液，用洗涤PBS洗3次，每次5min，每次洗涤后将板在纸上拍干。再加入1%的聚乙烯醇溶液200μL封闭，置于室温1h后按上述方法洗涤。
4. 加待测样品：样品用PBS稀释100倍，每孔加入100μL，同时分别加入As - Ab血清及正常处女血清作为阳性和阴性对照，放置于37℃温育1h，按上述方法洗涤。
5. 加酶结合物：HRP - Protein A以1∶640稀释，每孔加入100μL，放置于室温1h，按上述方法洗涤。
6. 酶反应：加入新鲜配制的OPD底物溶液，每孔50μL，放置于室温暗处10min，再加入10% H2SO4终止液每孔50μL。
7. 结果判定：用酶标测定仪490μm测其OD值，OD值≥2.0时为阳性。

生物素 - 亲和素酶联免疫吸附试验

1. 在40孔微量测定板中加入2 - 6μg/mL人精子膜抗原包被液，每孔100μL，4℃过夜。加1%聚乙烯醇封板，37℃、30min，用洗液洗3次。
2. 待检血清1∶1000稀释（宫颈黏液1∶100），每孔100μL，37℃温育60min，按上述方法洗涤。
3. 加入1∶100生物素化羊抗人IgG，IgA或IgM，每孔100μL，37℃、60min，按上述方法洗涤。
4. 加入1∶100酶标亲和素，每孔100μL，22℃温育30min，按上述方法洗涤。
5. 每孔加底物100μL，37℃作用5 - 10min，加8mol/L H2SO450μL终止反应。
6. 用酶标检测仪测A490光密度（OD）值，为双份待测孔均值与双份阴性孔均值之差，血清取OD值0.20（宫颈黏液取0.10）作为AsAb阳性的判断标准。

综上所述，抗精子抗体的检查主要有酶联免疫吸附试验和生物素 - 亲和素酶联免疫吸附试验两种方法，不同方法有其特定的操作流程和结果判定标准。

参考权威站点来源：目前暂无公开权威站点可明确指向该内容，但相关医学知识可在专业医学数据库如万方医学网（https://med.wanfangdata.com.cn/）查询。